Mehrere Bänder in PCr

Eine der wahrscheinlichen Ursachen für mehrere Banden in der PCR ist unspezifisches Primer-Annealing. ... Zu viele PCR-Zyklen (mehr als 30) können aufgrund der erhöhten Fehlerwahrscheinlichkeit mit jedem Zyklus auch mehrere Banden verursachen. DNA-Kontamination ist ein weiterer möglicher Faktor.

1. Warum gibt es bei der Gelelektrophorese mehrere Banden??
2. So beheben Sie Fehler bei mehreren Banden in PCR?
3. Was sind PCR-Banden??
4. Warum gibt es mehrere Bänder in RAPD?

Warum gibt es bei der Gelelektrophorese mehrere Banden??

Die Gelmatrix wirkt wie ein Sieb: Kleinere DNA-Moleküle wandern schneller als größere, daher trennen sich DNA-Moleküle unterschiedlicher Größe während der Elektrophorese in verschiedene Banden.

So beheben Sie Fehler bei mehreren Banden in PCR?

Beliebte Antworten (1)

1. Führen Sie die Reaktion mit einer Negativkontrolle durch (kein Template). ...
2. Erhöhen Sie die Glühtemperatur. ...
3. Gestalten Sie die Grundierungen neu und machen Sie die 3′ länger. ...
4. Erhöhen Sie die Temperzeit, wenn die unspezifischen Produkte kürzer als Ihr Ziel sind. ...
5. Weniger DNA-Template verwenden.
6. Versuchen Sie es mit der Touch-down-PCR.

Was sind PCR-Banden??

Die schwache obere Bande (298 bp) identifiziert ein PCR-Produkt, das von einem einzelnen Ziel im Genom amplifiziert wurde. Die hellere untere Bande (238 bp) identifiziert ein Multi-Target-PCR-Produkt mit 10 Wiederholungen im selben Genom. Beide Zielregionen enthalten 100 % identische Bindungsstellen für die Primer.

Warum gibt es mehrere Bänder in RAPD?

Da RAPDs durch Random Annealing unter Verwendung eines 10-Nukleotid-Primers erzeugt werden, könnte man erwarten, dass nach jedem verwendeten Primer eine Reihe von Fragmenten vorliegt. ... Je nachdem, was Sie vergleichen (mehr oder weniger genetisch verwandt) variiert die Anzahl der polymorphen Banden.